SARS-CoV-2 च्या व्हिज्युअल डिटेक्शनची नवीन पद्धत सुरुवातीच्या टप्प्यावर संसर्ग ओळखू शकते.गंभीर तीव्र श्वसन सिंड्रोम-कोरोनाव्हायरस-2(SARS-CoV-2) चे रिसेप्टर बाइंडिंग डोमेन (RBD) शोधण्यासाठी एक नवीन सँडविच आधारित लॅटरल फ्लो इम्युनोसे (LFIA) RT-PCR चाचण्यांसाठी एक कार्यक्षम पर्याय देऊ शकेल. हे व्हिज्युअल लाइन ऑफ डिटेक्शन (LOD) सह संसर्गाच्या सुरुवातीच्या टप्प्यावर SARS-CoV-2 चे RBD प्रतिजन शोधू शकते.
SARS-CoV-2 च्या व्हिज्युअल डिटेक्शनची नवीन पद्धत सुरुवातीच्या टप्प्यावर संसर्ग ओळखू शकते.
गंभीर तीव्र श्वसन सिंड्रोम-कोरोनाव्हायरस-2(SARS-CoV-2) चे रिसेप्टर बाइंडिंग डोमेन (RBD) शोधण्यासाठी एक नवीन सँडविच आधारित लॅटरल फ्लो इम्युनोसे (LFIA) RT-PCR चाचण्यांसाठी एक कार्यक्षम पर्याय देऊ शकेल. हे व्हिज्युअल लाइन ऑफ डिटेक्शन (LOD) सह संसर्गाच्या सुरुवातीच्या टप्प्यावर SARS-CoV-2 चे RBD प्रतिजन शोधू शकते.
RT-PCR आणि ELISA सारखी लोकप्रिय सुवर्ण मानक तंत्रे सहसा वेळखाऊ असतात, त्यांना कुशल कामगार, विशिष्ट उपकरणे आवश्यक असतात आणि ऑन-साइट शोध घेणे शक्य नसते.
या आव्हानावर मात करण्यासाठी, DBT-नॅशनल इन्स्टिट्यूट ऑफ अॅनिमल बायोटेक्नॉलॉजी (NIAB) आणि गांधी मेडिकल कॉलेजच्या संशोधकांच्या टीमने SARS-CoV-2 विषाणूचा लवकर आणि मैदानावर शोध घेण्यासाठी एक जलद आणि मजबूत व्यासपीठ विकसित केले आहे. चाचणी पट्टीच्या गुणात्मक विश्लेषणासाठी स्मार्टफोन अॅप (कलर ग्रॅब) वापरण्यात आला आहे. प्रतिजन-अँटीबॉडी परस्परसंवादाच्या तत्त्वावर काम करणा-या विकसित LFIA मध्ये SARS-CoV-2 चा शोध घेण्यासाठी कुशल कर्मचार्‍यांची गरज न पडता वापरण्याची आणि त्यानंतर व्हायरसचा प्रसार कमी करण्याची क्षमता आहे.
विज्ञान आणि अभियांत्रिकी संशोधन मंडळ (SERB), विज्ञान आणि तंत्रज्ञान विभागाच्या (DST) संस्थेच्या समर्थनाने वैज्ञानिक RBD प्रोटीन अभिव्यक्तीसाठी जबाबदार असलेल्या जनुकाचे क्लोन तयार करण्यासाठी आणि प्रतिपिंड (Ab) तयार करण्यासाठी ते शुद्ध करण्यासाठी एकत्र आले. व्युत्पन्न केलेल्या अँटीबॉडीज नंतर मोनोडिस्पर्स गोल्ड नॅनोपार्टिकल्स (AuNPs) सह संयुग्मित केले गेले आणि कलरमेट्रिक डिटेक्शनसाठी कॅप्चर प्रोब म्हणून वापरले गेले. फॅब्रिकेटेड एलएफआयए सँडविच फॉरमॅटमध्ये कार्य करते, जेथे नमुन्यातील आरबीडी लक्ष्य विश्लेषक गोल्ड नॅनोपार्टिकल संयुग्मित आरबीडी अँटीबॉडीशी संवाद साधून कॉम्प्लेक्स (AuNPs-Ab) बनवते, जे पुढे नायट्रोसेल्युलोज झिल्लीच्या बाजूने फिरते आणि आरबीडी अँटीबॉडीसह प्रतिक्रिया देते. लाल रंगाचा बँड तयार करण्यासाठी पडद्यावरील चाचणी रेषा.
RBD Ab आणि IgG दुय्यम Ab हे नमुन्यातील प्रतिजन (Ag) ची उपस्थिती तपासण्यासाठी अनुक्रमे चाचणी आणि नियंत्रण म्हणून नायट्रोसेल्युलोज झिल्लीवर लेपित होते. पुढे, नियंत्रण रेषेशी जोडलेले अतिरिक्त अँटीबॉडी दुय्यम IgG अँटीबॉडीसह लेपित केले जाते जे चाचणी पट्टीची कार्यक्षमता प्रमाणित करते. संपूर्ण पट्टीवर बॅकफ्लो रोखण्यासाठी पट्टीच्या शेवटी एक शोषक पॅड ठेवला होता.
चाचणी आणि नियंत्रण रेषेवर बँड रंगाची उपस्थिती सकारात्मक परिणाम दर्शवते तर नियंत्रणातील एकल रेषा नकारात्मक परिणाम दर्शवते. लक्ष्य विश्लेषकांच्या आधारावर, झिल्लीवरील ब्लॉकिंग बफर, अँटीबॉडी संयुग्मन एकाग्रता आणि प्रतिपिंड कोटिंग एकाग्रता यासारखे विविध पॅरामीटर्स जास्तीत जास्त बंधनकारक कार्यक्षमतेसह बँड रंग प्राप्त करण्यासाठी अनुकूल केले गेले आहेत. चाचणी रेषेच्या बँड तीव्रतेचे विश्लेषण प्रतिमा संपादन आणि चाचणी रेखा रंगाचे विश्लेषण करण्यासाठी एक साधा स्मार्टफोन-आधारित अनुप्रयोग वापरून केला गेला, जो कोणताही रंग डेटा त्याच्या तीन प्राथमिक रंग घटकांमध्ये विभाजित करू शकतो - लाल, हिरवा आणि निळा (RGB डेटा ). विशिष्ट रंग घटक रंगाची तीव्रता वाढवण्याचा किंवा कमी करण्याचा कल दर्शवितो. हा अभ्यास नुकताच जर्नल ऑफ मेडिकल व्हायरोलॉजीमध्ये प्रकाशित झाला आहे.
विकसित एलएफआयए स्ट्रिप्स पोर्टेबल, पॉइंट ऑफ केअर डिव्हाईस (PoC) म्हणून SARS-CoV-2 च्या साइटवर शोधण्यासाठी विशेषतः घरी किंवा अगदी ग्रामीण भागात उपयुक्त ठरू शकतात. शिवाय, मानक RT-PCR चाचणीच्या तुलनेत LFIA स्ट्रिप्सची किंमत खूपच कमी आहे ज्यामुळे RT-PCR चाचणी घेणे परवडत नाही अशा लोकांसाठी अधिक किफायतशीर पर्याय बनते.
संपर्क माहिती:
1) डॉ. सोनू गांधी (वैज्ञानिक ई, DBT-नॅशनल इन्स्टिट्यूट ऑफ अॅनिमल बायोटेक्नॉलॉजी (NIAB), हैदराबाद-500032, तेलंगणा, भारत); ईमेल- gandhi@niab.org.in
2) दृष्टी प्रकाशन (पीएचडी विद्यार्थी, DBT-नॅशनल इन्स्टिट्यूट ऑफ अॅनिमल बायोटेक्नॉलॉजी (NIAB), हैदराबाद-500032, तेलंगणा, भारत); email-drishyaprakashan333[at]gmail[dot]com
टिप्पण्या